第一步，探讨PRMT1在肝细胞癌中上调的机制 已有结果显示，PRMT1的蛋白水平在HCC中上调，但PRMT1 mRNA水平没有变化。推测泛素-蛋白酶体降解可能参与PRMT1的上调。用两种不同的蛋白酶体抑制剂处理细胞，发现PRMT1蛋白水平呈剂量依赖性增加（图1a），表明PRMT1的蛋白水平可以通过泛素介导的降解来调节。 第二步，确定PRMT1降解的关键泛素连接酶 根据设计的筛选策略，E3泛素连接酶FBXO7为候选互作蛋白（图1b-c）。IP-MS分析显示FBXO7是前10个与PRMT1相互作用的候

【DNA提取液】JS0700 质量参数 产品名称：PHENOL:CHLOROFORM:ISOAMYL ALCOHOL(25:24:1) 储存温度：2-8°C 技术信息： 1、PH值：≥7.8 2、用于DNA提取。质控测试：DNA酶Free、RNA酶Free、蛋白酶Free均不含。 3、配合调节pH值的平衡缓冲液使用；Equilibrated with 10 mM Tris, pH 8.0, 1 mM EDTA 【RNA提取液】JS0900 质量参数 产品名称：PHENOL:CHLOROFORM:ISOAMYL ALCOHOL(25:24:1) 储存温度：2-8°C 技术信息： 1、PH值：PH ＜ 5.2 2、用于RNA提取。质控测试：DNA酶Free、RNA酶Free、蛋白酶Free均不含。 3、配合调节

糖尿病肾病（DKD）是一种普遍存在的慢性肾脏疾病，是终末期肾病进展的主要原因。足细胞是覆盖GBM外表面的高度分化的上皮细胞，对于维持GBM的完整性至关重要。因此，足细胞损伤的程度通常用来评估DKD的进展。此外，足细胞中的炎症积聚与足细胞损伤的加重密切相关。 2024年6月，温州医科大学梁广团队在Nat Commun（IF=14.7）上，发表“Podocyte OTUD5 alleviates diabetic kidney disease through deubiquitinating TAK1 and reducing podocyte inflammation and injury”的研究成果。揭示

一、百萤活性氧Cell Meter线粒体羟基自由基检测试剂盒简介 细胞内羟基自由基的检测对于理解适当的细胞氧化还原调节及其失调对各种病理的影响至关重要。羟基（HO·）是与其他分子高度反应的活性氧（ROS）之一，以实现稳定性。通常，羟基被认为是氧化代谢的有害副产物，其可以在生命系统中引起分子损伤。它显示平均寿命为10-9秒，可以与几乎所有生物分子如核DNA，线粒体DNA，蛋白质和膜脂质发生反应。 MitoROS OH580是活细胞渗透探针，可以快速和选

自增压液氮罐不是压力容器！ 在不工作时，自增压液氮罐内部没有压力或压力较低。当需要输出液氮时，罐内的少量液氮蒸发产生压力，这个压力用于将液氮排出，通常控制在相对较低的压力值，不大于0.09MPa。 这种设计是为了在安全范围内实现液氮的自增压和传输，而不是持续承受高压力。 因此，虽然它在操作过程中会产生并利用压力，但工作压力低且不工作时无压力。 而压力容器是指一类在工业生产和日常应用中广泛存在的密闭设备，其主要特

选择YDS-95-216大口径液氮生物容器有以下几个理由： 1、大容量与大口径设计：YDS-95-216液氮罐拥有95升的容积和216毫米的口径，这样的设计特别适合实验室使用。大容量意味着可以储存更多的生物样本，而大口径则使得存取样本更加方便，避免了在提取过程中可能发生的碰撞和损坏，同时也便于放置较大的冻存架或冻存盒。 2、高效储存与存取：实验室的液氮容器通常需要容纳数量众多的冻存管，并且经常需要频繁地存取样本。YDS-95-216液氮罐配备的冻存

1.什么是DiI？它的用途是什么？ 答：DiI即DiIC18（3）是常见的细胞膜荧光探针之一，全称为1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine 。呈现橙红色荧光。DiI是一种亲脂性膜染料，进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱，仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被激发后可以发出橙红色的荧光。它的家族还有DiR、DiO、DiA、DiS、DiD。 2.如何区别DiI探针中的C12、C16、C18？ 答：从水溶性

求一株MC3T3-E1细胞，救救孩子吧，孩子的细胞养不起来呜呜呜

细胞凋亡是指在特定的生理或病理状况下，细胞依照自身的程序，自行终结其生命的过程。这是一个主动、高度有序且由基因控制，并有一系列酶参与的过程。磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine，PS）通常处于细胞膜的内侧，然而在细胞凋亡的初期，PS 会从细胞膜的内侧翻转至细胞膜的表面，展露在细胞外的环境当中。把标记有荧光素或者 biotin 的 Annexin V（一种 Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与 PS 具有高亲和力且能特异性结合）与 PC 结合，通过流式细胞仪或者

UBE2C促进SNAT2的单泛素修饰，抑制其多泛素修饰。 检测步骤： 第一步，筛选UBE2C蛋白底物SNAT2 IP-MS和泛素蛋白质组学检测发现：SNAT2是UBE2C泛素修饰的底物（图1a）。 第二步，UBE2C与SNAT2相互作用 Co-IP等实验检测证实UBE2C与SNAT2相互作用（图1 b-c）。 第三步，发现UBE2C促进SNAT2的单泛素化，阻断K63连接的泛素链的延伸 Co-IP分析显示发现UBE2C促进SNAT2的单泛素化，但阻断了泛素链的延伸（图1 d-e）。分别构建不同泛素突变体Ub-WT,K6R,K11R,K 27R, K29R, K33R，K48R，K63R(基

求救大佬们，这个是什么污染，我养的是hcc1806

液氮罐不但可以用来冷冻配件，常见的用途还有冻存胚胎，但细胞对环境敏感，稍有不慎便可能会被污染，用户使用存放胚胎的冻存罐时，要注意哪些污染呢？ 一、气体、微生物污染 当液氮罐存放环境不合适或使用不当时，比如空气中湿度大，开盖取样过程中水汽进入液氮罐内部，接触低温后，在内胆、颈管等部位凝结成冰，附着在内胆上，拿取样本时难度会增加，还可能破坏颈管，导致真空泄露，缩短液氮罐使用期限。 且长时间不去冰、清洁液氮

1.百萤活性氧(ROS)概述 活性氧(ROS)是具有化学活性的含氧分子，是作为细胞代谢的副产品自然产生的。在生理条件下，ROS水平受到仔细调节，它们在正常细胞信号转导、细胞周期、基因表达和体内平衡中充当信使。 当过量产生时，ROS有可能导致许多有害事件。在高浓度下，ROS会在细胞中诱导氧化应激，从而导致细胞大分子（如核酸、膜脂和细胞蛋白质）的后续损伤。这些生物分子的氧化损伤可引发细胞凋亡，与衰老有关，并与多种疾病、癌症和神经退

菌种保藏是指将具有特定生物学性质的微生物菌种以低温保存起来，做长效研究使用。说到低温保藏，那就是液氮罐。利用-196℃液氮完美留存活性。 液氮大家知道，现在美食行业利用其特性，不仅能让食品瞬间锁鲜，还能有效杀毒灭菌，既然灭菌，为何还用液氮罐保藏菌种？难道不害怕菌种死亡么？ 答:不用担心！ 因为菌种不是直接接触罐内的液氮！ 为了保证菌种安全，避免交叉污染等意外状况发生，在做菌种保藏前，就会根据微生物类别选择合适

一、百萤 活性氧ROS Brite HPF简介 活性氧（ROS）是含氧的化学反应性分子（如超氧化物，羟基，单线态氧和过氧化物）。由于存在不成对的价电子，ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物，并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而，在环境压力（例如，UV或热暴露）期间，ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地，这被称为氧化应激。 ROS也由外源性源如电离辐射产生。在氧化应激条件下，ROS产生显着增加

三阴性乳腺癌（TNBC）是乳腺癌中最恶性的亚型。TP53突变是肿瘤常见的抑癌转促癌突变。在TNBC患者中，TP53突变率高达80%，其突变会导致化疗耐药或免疫治疗效果差等临床问题。因此，迫切需要阐明分子机制并确定TNBC进展的新靶点。 2024年7月，山东大学杨其峰团队在Adv Sci（IF=14.3）上，发表“CircCFL1 Promotes TNBC Stemness and Immunoescape via Deacetylation-Mediated c-Myc Deubiquitylation to Facilitate Mutant TP53 Transcription”的研究成果，提示了TNBC中突变TP53调控的新机制，并为TNB

核酸电泳常见问题 1. 无条带或条带较弱 （1）上样量不足 尝试进一步增加上样量。 （2）核酸降解 在核酸提取和电泳过程中，使用分子生物学等级试剂，切勿使用含核酸酶的耗材，避免核酸酶污染。 （3）电泳缓冲液使用不当 TAE缓冲液短期内更适用于分离大片段，长时间运行易产热；TBE缓冲液对于更短片段更好，适用于长时间运行而不易导致过热，但可能会减缓线性dsDNA的迁移。 （4）DNA跑出凝胶 DNA小片段分子量较小，迁移速率快，容易跑出凝胶。可

1.百萤 SO Green 520WS单线态氧探针参数 Ex -- Em -- 分子量 N/A 溶剂 DMSO 存储条件 在-15℃以下保存，避光防潮 2.百萤 SO Green 520WS单线态氧探针介绍 SO Green 520WS 单线态氧探针被开发为水溶性荧光探针，用于检测细胞外单线态氧，因为它不渗透细胞。它对单线态氧具有高度选择性。与其他可用的荧光和化学发光单线态氧检测试剂不同，SO Green 520WS 单线态氧探针不会对羟自由基、超氧化物或其他活性氧 (ROS) 显示任何明显的响应。该指示剂仅呈现微弱的蓝色荧光。

适用于无血清培养 原代培养所需营养 实用于杂交瘤等细胞培养..[图片][图片] 需要

鼻咽癌（NPC）是一种影响头颈部的癌症。目前，化疗是局部晚期鼻咽癌（LA-NPC）患者的标准方案。然而，约10%的鼻咽癌患者出现化疗耐药，导致预后不理想。因此，阐明化疗耐药的分子机制至关重要。 2024年7月，中山大学唐玲珑和赵银团队在Adv Sci（IF=14.3）上，发表“DCAF7 Acts as A Scaffold to Recruit USP10 for G3BP1 Deubiquitylation and Facilitates Chemoresistance and Metastasis in Nasopharyngeal Carcinoma”的研究成果，发现DCAF7在体外和体内促进鼻咽癌细胞的顺铂耐药和转移。 图

肿瘤即使在含氧量正常的情况下，也会利用糖酵解作为能量代谢的主要来源，这种Warburg效应，促使肿瘤细胞具有丰富的乳酸代谢特征。肿瘤乳酸的促癌机制，是肿瘤靶点开发的重要内容。 2024年3月，同济大学、复旦大学及安徽科技大学等多单位合作在J Clin Invest（IF=13.3）上，发表“The alanyl-tRNA synthetase AARS1 moonlights as a lactyltransferase to promote YAP signaling in gastric cancer”的研究成果，研究发现tRNA合成酶丙氨酰-tRNA合成酶（AARS1）具有乳酰转移酶活性，通过修

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STI-PCR（SuppressionThermo-Interlaced PCR）扩增DNA片段超能力：用引物合成DNA片段7 kb；任意序列拼接24 kb；基因组扩增38 kb。 按：生命科学研究不断走向纵深，从单基因研究到系统生物学研究，都离不开对基因的操纵。过去，PCR技术极大的推动了生命科学研究的进程。现在，在更复杂的系统生物学领域，扩增操作长片段 DNA时，PCR遇到新的挑战。长片段DNA扩增（>10kb）容易出现非特异片段或引物二聚体的扩增，与目标片段形成竞争扩增，从而降低了长目标片段

代谢异常是肿瘤细胞的重要特征之一，与肿瘤发生发展密切相关。氨基酸代谢是肿瘤代谢偏好的重要特征，是肿瘤诊疗的潜在靶点。本文介绍丝氨酸合成代谢在肝癌中的功能和机制，为丝氨酸代谢异常的靶点开发提供分子基础。 2024年6月，四川大学王魁研究团队在Nature Communications杂志上，发表“FBXO7 ubiquitinates PRMT1 to suppress serine synthesis and tumor growth in hepatocellular carcinoma”的研究成果，揭示了E3泛素连接酶FBXO7通过促进 PRMT1泛素化降解、抑制丝氨酸代谢

一、百萤 Annexin V-Cy5标记简介和工作原理 细胞凋亡是细胞的基本特征之一，它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定和一些疾病发生过程等方面起着十分重要的作用。 在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。在体内，巨噬细胞可以识别翻转到细胞膜表面的PS 从而将这些程序性死亡的细胞清除，因此凋亡过程中并不伴随局部的炎症反应，而在细

什么是RNA提取 细胞中的RNA可以分为信使RNA、转运RNA和核糖体RNA三大类,不同组织总RNA提取的实质就是将细胞裂解,释放出RNA,并通过不同方式去除蛋白,DNA等杂质,最终获得高纯度RNA产物的过程。 RNA提取的使用目的 通过总RNA提取可获得高纯度及高质量的总RNA,可用于实时荧光定量PCR、Northern blot、microRNA检测、芯片分析, DNA文库构建,基因克隆等实验。RNA用于不同的后续实验,其质量要求不尽相同。 cDNA文库构建要求RNA完整而无酶反应抑制物残留; Northern对RNA完整

百萤 Annexin V-AF488标记参数： Ex(nm)：499 E m(nm)：520 分子 量：~36000 溶 剂：Water 存储条件：在零下15度以下保存，避免光照 百萤 Annexin V-AF488适用仪器 （1）流式细胞仪 激发：488nm激光 发射：530/30nm滤波片 通道：FITC通道 （2）荧光显微镜 推荐孔板：黑色透明 通 道：Pacific Blue通道 百萤 Annexin V-AF488实验方案 概述 用测试化合物（200μL/样品）制备细胞 添加Annexin V结合物测定溶液 室温孵育30-60分钟 用流式细胞仪或荧光显微镜分析 1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵

一、百萤 Annexin V-Cy3标记概述： Annexin V-Cy3标记是用于检测细胞功能的探针，膜联蛋白是钙依赖性磷脂结合蛋白家族。 它们富含真核生物，属于参与信号转导的普遍存在的细胞质蛋白家族。 膜联蛋白V的优先结合配偶体是磷脂酰丝氨酸（PS），其通常保持在细胞膜的内叶（细胞质侧）。 在细胞凋亡中，PS被转移到质膜的外部小叶。 磷脂酰丝氨酸在细胞表面上的出现是细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指示，并且可以在观察到形态变化之前检测到。 我们的

注1:整个缀合过程可以在 一天内完成。但是，缀合前对APC 的纯化可能需要24-48小时。除了下面 列出的材料外，您还需要浓度至少为2mg/ml的抗体溶液。请您在进行APC抗体缀合实验之前熟悉 如何使用脱盐柱以及如何获取吸光度光谱。 注 2 : SMCC-APC缀合物非常稳定(在“交换缓冲液”中，在4℃下至少可以稳定几个月)。因此， 如果您需要节省一部分时间，可以选择同时缀合10毫克或更多的 APC,并将其用于几次抗体实验(在几周内)。 一 .APC的制备 1. 将APC纯化。缀

分析方案 概述 用测试化合物（200μL/样品）制备细胞 添加Annexin V结合物测定溶液 室温孵育30-60分钟 用流式细胞仪或荧光显微镜分析 1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵育细胞： 1.1制备膜联蛋白V结合测定缓冲液：10mM HEPES，140mM NaCl和2.5mM CaCl2，pH 7.4。 1.2用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。 1.3离心细胞，得到1-5×105个细胞/管。 1.4将细胞重悬于200μL膜联蛋白V结合测定缓冲液中（来自步骤1.1）。 1.5在

1.膜联蛋白结合缓冲液（10X）简介和工作原理 膜联蛋白 V 结合缓冲液 * 10X 优化用于成像和流式细胞术* 是一种等渗缓冲液，用于促进使用膜联蛋白 V 偶联物标记凋亡细胞。 该缓冲液的 pH 值为 7.4，含有浓度的钙，可促进膜联蛋白 V 与凋亡细胞表面暴露的磷脂酰丝氨酸残基结合。 膜联蛋白 V 结合缓冲液 *10X 优化用于成像和流式细胞术* 以 10X 浓缩液形式提供。 在膜联蛋白 V 染色之前，我们建议使用蒸馏水将 10X 浓缩液稀释为 1X 工作溶液。 实验后，丢弃

1 蛋白质表达量低：目标蛋白在样本中的表达量可能低于检测限，导致条带弱或不可见。 解决方法：使用更多的细胞或组织样本，或者增加蛋白的加载量。 2 不适当的抗体：使用的一抗或二抗可能特异性不强，或者稀释比例不当。 解决方法：验证抗体的特异性，优化抗体稀释比例。 3 样本处理不当：样本在裂解、煮沸或电泳过程中可能受到损坏。 解决方法：优化样本裂解条件，确保煮沸时间和电泳条件适宜。 4 转膜效率低：蛋白质可能未能有效从凝

铁死亡（Ferroptosis）是一种铁离子依赖的，脂质过氧化积累导致的细胞破裂程序性死亡，是一种区别于细胞凋亡坏死的新型细胞死亡方式。靶向铁死亡是开发肿瘤精准治疗的重要路径。 2024年2月，美国哥伦比亚大学顾伟教授团队在Cell Metabolism杂志上，发表“PHLDA2-mediated phosphatidic acid peroxidation triggers a distinct ferroptotic response during tumor suppression”的研究成果，揭示了一种膜结合蛋白PHLDA2（Pleckstrin homology-like domain family A member 2）介导且不依赖于GPX4的新型铁