琵琶定弦，在传统乐曲中变化较多， 四条空弦之音的音程关系并不固定。但比较常用的定弦法， 是把四条弦由缠弦至子弦固定为A、d、e、a四个音。即D调。 初学者宜先学D调， 定弦是以D调为标准进行定弦。
校定弦音的方法：初学琵琶时， 如对音准观念还未培养与建立，就不会校定弦音。 此时更宜养成定准弦音的习惯。若弦音未定准，就不练习。
在定A、d、e、a的弦音时，可根据笛、箫、口琴、钢琴、音叉等的a音音高，先定好空子弦；然后在第一品位上按子弦弹出e'（比e音高八度）来，作为定空中弦e音的依据；再在第四品上按中弦弹出d'（比d音高八度）来， 作为校定空老弦d音的依据；最后在第一品位上按老弦弹出a 音来（或弹空子弦的a音），作为校定空缠弦A 音的依据。
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