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潮起
潮落
生物分子
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SDS法提取人类基因组DNA,原料是在下的脱落口腔上皮细胞。加氯化钠离心后沉淀分层,上层是这种黄的胶冻状屋子,下层应该是蛋白质。上清液加到乙醇里面之后没有看到明显的絮状沉淀。求问可能是什么原因?
送TA礼物
IP属地:北京
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1楼
2022-11-22 13:09
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灬狗干
小吧主
13
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额,听我搞医学的朋友说他们提的DNA从来看不见,都是跑电泳之后才能确定
我提植物的倒是个个絮状物沉淀
也可能你方法有问题吧,我一直用CTAB,SDS已经忘了
IP属地:福建
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2楼
2022-11-22 16:11
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贰零三生
原生动物
4
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可以给点详细的溶液参数吗,各个实验室用的溶液不太一样,你这个SDS是什么时候加入的,一般加SDS应该就可以看到沉淀了,NACl什么浓度也很重要,一般不会有胶冻才对。
IP属地:上海
3楼
2022-11-22 17:19
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贰零三生
原生动物
4
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而且我记得我们实验室上次做这个加氯化钠之后反而弃去上清,因为NaCl一般不会导致细胞裂解,离心后反而是弃去上清。然后加入裂解液再加SDS之类的
IP属地:上海
4楼
2022-11-22 17:23
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弓玄道人
多孔动物
5
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我们实验室10^6个细胞最终得到DNA沉淀量估计下也就大约几个平方毫米的白色 你的口腔上皮细胞刮了多少下来啊 方便说下你的具体步骤吗
IP属地:陕西
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5楼
2022-11-22 17:46
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安国大将军
纽形动物
9
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DNA越纯越透明
如PCR引物,充分干燥后根本看不见,装引物的ep管宛如空管
哪怕最后用低温70%乙醇处理也是如此——除非提取量很大(如鼠尾)才会在ep管底部出现少许白点
另外你这提取样本量太少——不就是棉签刮刮口腔的程度,能有多少东西?
而提取的容器又太大——目测是15ml管,太大了
要知道DNA只是在70%乙醇里溶解度“最小”而不是“完全不溶”
,乙醇加太多也会把你DNA溶掉,而避免这样的方法就是更换小一点的容器(比如1.5ml ep管)、减少乙醇用量(比如一次用1ml)和清洗次数
IP属地:上海
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6楼
2022-11-22 21:54
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greencatlv猫
棘皮动物
14
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太少了看不出来
IP属地:北京
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7楼
2022-11-22 21:55
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无以往哉
原核生物
3
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估计是沉淀破裂了,缺少元素液体
IP属地:河南
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8楼
2022-11-23 22:14
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潮起
潮落
生物分子
1
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IP属地:北京
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9楼
2022-11-30 23:11
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潮起
潮落
生物分子
1
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然后,跑出来了。全是蛋白质,一点DNA都没
当天我有点口腔溃疡,跟这有关系吗
IP属地:北京
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10楼
2022-11-30 23:12
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