动植物检疫吧 关注:332贴子:1,461
  • 0回复贴,共1

细胞培养时的三个常见小问题

只看楼主收藏回复

细胞培养用的培养基是不是必须加双抗?血清在使用之前是不是一定要灭活?往培养基里加细胞因子又是什么操作?
关于这三个问题,今天在这里分享一下我的看法。
要不要加双抗?
在培养基中添加抗生素是一种常见的操作,其主要作用是抑制或杀死培养物中的某些细菌或真菌,从而避免它们对目标细胞的干扰和污染。
在培养实验中,选择适当浓度和种类的抗生素,可以有效地消除或减少杂菌、污染菌或其他不需要的微生物,保证培养物的纯度和稳定性。
同时,添加抗生素还可以用来筛选或检测耐药性菌株,评估其对抗生素的敏感性和耐受性。
但是,添加抗生素并不能确保你的细胞一定不被微生物污染,因操作不当造成污染的还是会被污染的。
并且,一旦细胞被污染,抗生素也只能起到一定的抑制延缓作用,并不能彻底杀灭微生物。而且,长期添加抗生素的话,还容易掩盖培养环境的真实情况。
因此 ,虽然在培养基中添加抗生素是常见操作,但并不是必须操作。
细胞因子是什么?
除了抗生素外,培养基中还可以添加细胞因子,以模拟体内环境和调节细胞功能。
细胞因子是一类多肽分子或蛋白质,由细胞自身或其他细胞产生,并通过受体介导的信号转导途径影响目标细胞的增殖、分化、存活、迁移等过程。
在细胞培养中,添加适当浓度和种类的细胞因子,可以促进细胞增殖和分化,提高细胞存活率和功能表现。
例如,添加表皮生长因子(EGF)可以促进表皮细胞增殖和修复;添加肝细胞生长因子(HGF)可以促进肝细胞增殖和再生;添加白细胞介素-2(IL-2)可以促进T淋巴细胞增殖和活化等。
此外,添加某些细胞因子还可以诱导干细胞分化为特定类型的成体细胞,如添加神经营养因子(NGF)可以诱导干细胞分化为神经元。
血清要灭活才能用?
血清中含有生长因子可促进细胞繁殖,含有附着因子可促进细胞贴壁,同时还有一种特殊的活性能抵抗胰蛋白酶的消化作用。
血清内含有丰富的矿物质、酯类和激素。最常见的血清包括:小牛血清、胎牛血清、成年马血清等。其中胎牛血清对培养要求高的细胞系效果最好。
血清来源于动物, 因此必定存在批次间的差异,且生产过程中由于工艺流程的不同,哪怕是同一类型的血清也会存在质量上的巨大差异。
血清的灭活是将血清置于56摄氏度中30分钟,然后再分装成数份保存于-20摄氏度。
血清加热的最初目的是为了免疫分析时用于灭活补体的,因此就有了血清使用前要灭活的说法。
但现在商业化的血清产品,基本上出厂之前都经过了灭活处理,所以一般情况下,就不需要再操作一次灭活了,除非供应商在销售时特别强调了要进行这个操作。


IP属地:河北1楼2024-01-11 16:52回复