原发性肝癌(PLC)是一种最常见的恶性肿瘤,我国每年有约13万人死于原发性肝癌。目前肝癌的临床治疗主要包括手术切除、放疗、化疗、靶向治疗等。VX2兔肝癌原位模型是迄今为止唯一能够在较大动物建立的肝转移性肿瘤模型,该模型多用于肝脏肿瘤的影像学和治疗学研究。该模型肿瘤发展过程与人肝癌相似,是最理想的肝癌实验模型,在该模型上开发出的药物和疗法对指导临床选择肿瘤治疗方案有重大意义。
1、实验动物
新西兰大白兔,雌雄各半,5~6月龄。
2、实验方法
2.1 兔VX2肝癌模型建立
将瘤块于37℃下解冻,先将瘤块上的坏死组织和肌肉组织去除,然后将瘤块上的鱼肉样组织剪碎成大小约为1~2mm3小块,将其浸泡在无菌盐水中,用注射器抽取瘤块。
采用开腹直视下瘤组织块穿刺注入法接种。实验兔接种前12小时禁食但不禁水,术前给予兔戊巴比妥钠麻醉,在以标准外科方式准备和覆盖腹部后,用小刀片做垂直方向的剑突下小切口,并使用钝性剥离通过无血管白线暴露腹膜,仔细划分腹膜可以看到肝脏,逐层入腹,暴露肝脏下缘。使用扩开器将切口扩开,动作温和的将暴露肝脏内侧段和外侧段拉出体外,注意避免肝包膜撕裂,暴露的器官应用湿纱布保持湿润。将含有瘤块的注射器换用18G穿刺针斜穿刺入肝左叶,注射瘤块混合液0.1mL,随后迅速拔出穿刺针,穿刺点渗出的少量血用无菌棉签压迫止血。将肝脏左叶放回体内后,逐层缝合腹膜、肌肉、皮肤。缝合后在皮肤创口处涂撒少量注射青霉素粉针剂。术后连续4天在实验兔大腿外侧肌肉注射青霉素,并用碘伏擦拭手术创口来预防感染。
2.2 CT 肿瘤观察
接种后14天,将动物麻醉后置于螺旋CT下进行胸腹部扫描。CT参数为管电压80kV,管电流60mA。先平扫定位,后序贯动态三期增强扫描,采集时间分别为动脉期(15s)、静脉期(25s)和延迟期(45s)。
3、结果
VX2兔肝癌原位模型的生长情况
14天后CT检查所有动物肝脏部位,此模型的成功率几乎达100%。