第一步，OTUD5共同负调控TAK1-MAPK激活
WB检测证实，OTUD5过表达显著抑制HG/ pa诱导的足细胞TAK1磷酸化，但不改变TAK1总蛋白水平（图1a）。敲低OTUD5则相反（图1b）。MAPK通路是TAK1激活的主要下游信号，包括三个亚家族：JNK、ERK和p38。研究结果表明，在HG/ pa处理的足细胞中，OTUD5过表达也会抑制ERK、P38和JNK的激活，但OTUD5敲低会加剧ERK、P38和JNK的激活（图1c-d）。在HG/PA处理下，OTUD5共同负调控TAK1-MAPK激活。
第二步， OTUD5抑制TAK1与TAB2相互作用
Co-IP实验发现，OTUD5的过表达减少了TAK1与TAB2相互作用，而催化失活的突变体OTUD5-C224S则不能（图1e）。此外，在HG/ pa处理的足细胞中，OTUD5抑制TAK1-MAPK通路的激活，但OTUD5-C224S突变体则不能（图1f）。
第三步，OTUD5通过在K158位点阻断TAK1-TAB2相互作用来抑制TAK1的激活
Co-IP分析显示，当TAK1中的K158突变为R残基时，TAK1与TAB2的相互作用减少，而OTUD5不能进一步影响TAK1与TAB2的相互作用（图1g）。同样，TAK1 K158R突变抑制TAK1- mapk在HG/PA刺激下的激活（图1h）。表明OTUD5通过在K158位点阻断TAK1-TAB2相互作用来抑制TAK1的激活。
如有泛素相关机制研究，欢迎留言探讨。